Câu trả lời:
Đây là một quá trình để tách các protein khác nhau dựa trên tính chất liên kết và điện tích của chúng với vật liệu.
Giải trình:
Ở độ pH khác nhau, các protein khác nhau mang điện tích khác nhau. Bằng cách đặt hỗn hợp protein ở độ pH đã đặt, bạn có thể có hỗn hợp chứa protein với các thuộc tính điện tích khác nhau.
Nếu hỗn hợp protein này được đổ vào cột chứa vật liệu có điện tích trên cột, cột sẽ liên kết các protein trong điện tích trái dấu.
Sau đó, bạn có thể sử dụng các giải pháp khác nhau chứa lượng ion khác nhau để rửa giải (không dính) các protein từ cột.
Ví dụ, giả sử bạn có một hỗn hợp protein mà bạn muốn tinh chế một loại protein cụ thể. Nếu bạn biết rằng ở một độ pH cụ thể, protein quan tâm của bạn được tích điện dương, bạn có thể đổ hỗn hợp lên cột chứa vật liệu tích điện âm.
Tất cả các protein không mang điện tích hoặc khi tích điện âm sẽ chảy thẳng qua cột. Sau đó, bạn có thể giải phóng protein tích điện dương của mình bằng cách làm ngập cột với các ion dương sẽ hoàn thành điện tích âm trên cột. Sự cạnh tranh này sau đó sẽ khiến protein quan tâm của bạn bị rửa giải.
Dưới đây là một ví dụ về điều này xảy ra.
Mỗi khay chứa một bộ đệm ở nồng độ khác nhau và có thể thấy trong mẫu 175 mM (góc trên cùng bên trái) rất ít protein màu đỏ / nâu liên kết với màng tích điện khi có sự cạnh tranh giữa các ion trong bộ đệm và protein cho các vị trí liên kết tích điện trên màng (Các ion trong bộ đệm đã "thắng" vì có nhiều trong số chúng và do đó chúng đã ngăn protein liên kết). Trong mẫu ở phía dưới bên phải, rất nhiều protein đã liên kết với màng vì có ít ion hơn để cạnh tranh cho các vị trí liên kết.
Trong video này, bạn có thể thấy sắc ký trao đổi anion đang hoạt động: