Làm thế nào để các nhà khoa học cô lập DNA để nghiên cứu nó?

Làm thế nào để các nhà khoa học cô lập DNA để nghiên cứu nó?
Anonim

Câu trả lời:

Có một vài bước để làm điều này, xin vui lòng bỏ qua tiếng Anh xấu của tôi, tôi hy vọng bạn vẫn có thể hiểu quá trình.

Giải trình:

Điều này không khó như bạn nghĩ.

Giả sử chúng ta muốn tách DNA ra khỏi tuyến ức, bạn cần làm theo các hướng dẫn này (chúng giống với một quả táo theo như tôi biết, nhưng có những biến thể nhỏ):

  1. Lấy 3 miếng 3 gram và cắt thành từng miếng nhỏ, càng nhỏ càng tốt.

  2. Đặt nó vào máy xay sinh tố, với 75 ml Saline-sodium citrate (SSC) mỗi mảnh và đảm bảo lưỡi dao của máy xay được bao phủ hoàn toàn trong SSC, vì vậy hãy thêm một miếng tuyến ức nếu bạn cần.

    SSC đảm bảo màng tế bào đang được hòa tan.

    Tiếp tục trộn cho đến khi mọi thứ đều trơn tru.

  3. Đặt nó vào một ống cho máy ly tâm và xé nó bằng một ống khác để máy ly tâm không bị vỡ

  4. Đặt ống vào máy ly tâm trong 20 phút với tốc độ 5000 vòng / phút

  5. Khi bạn lấy các ống ra khỏi máy ly tâm, bạn sẽ thấy giữ hai thành phần. Đáy có một chất rắn, cái này được gọi là viên và cái này giữ nhân tế bào với DNA. Bạn cũng sẽ thấy một chất lỏng, được gọi là chất nổi trên bề mặt và nó bao gồm SSC với màng tế bào hòa tan.

  6. Đổ chất nổi lên trên trong một chuyển động của chất lỏng, điều này được gọi là khử màu và điều này khiến bạn bị viên.

  7. Cho một lượng nhỏ NaCl 2,2 M vào ống cùng với viên, sao cho viên chỉ được bao phủ trong NaCl. NaCl làm cho các protein bao quanh DNA kết tủa.

  8. Khuấy nó bằng ống nghiệm rỗng hoặc que khuấy. Cuối cùng, bạn sẽ nhận được hai thành phần. Các protein ở phía dưới và một chất lỏng nhớt ở trên đó.

  9. Lấy chất lỏng nhớt ra bằng pipet và đảm bảo bạn không lấy bất kỳ protein nào với chất lỏng nhớt. (những miếng protein rất nhỏ rất khó tránh, nhưng hãy cố gắng tránh càng nhiều protein càng tốt)

  10. Đặt chất lỏng nhớt mà bạn đã đổ vào cốc thủy tinh và thêm gấp 2 lần lượng ethanol vào nó. Nhưng thêm nhẹ nhàng ethanol vì bạn không muốn trộn nó với DNA. Tại giao diện giữa ethanol và chất lỏng nhớt, bạn sẽ thấy bong bóng DNA xuất hiện.

  11. Khuấy nhẹ bằng que thủy tinh, DNA được tích điện âm nên sẽ dính vào que.

  12. Đặt nó vào ống nghiệm và hòa tan với SSC.

Một cỗ máy đặc biệt sau đó có thể cho bạn biết bạn đã phân lập được bao nhiêu DNA và độ tinh khiết của nó.